EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。...
無血清細(xì)胞凍存液的操作方法主要包括細(xì)胞的收集、離心、凍存液的加入、分裝、凍存以及后續(xù)的解凍與復(fù)蘇等步驟。以下是詳細(xì)的操作方法:一、細(xì)胞的收集與離心細(xì)胞收集:使用常規(guī)方法收集處于對數(shù)生長期的懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞。對于貼壁細(xì)胞,可以使用胰酶或EDTA等試劑進(jìn)行消化,使其從培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板表面脫落,然后收集到試管或離心管中。細(xì)胞離心:將收集到的細(xì)胞懸浮液置于離心管中,進(jìn)行離心處理以收集細(xì)胞沉淀。離心條件通常為1,0002,000rpm,4℃,持續(xù)35分鐘。注意,離心時(shí)應(yīng)確保溫度適宜,以...
蛋白酶K,屬于一種廣譜蛋白酶,由白色念珠菌(Candidaantarctica)發(fā)酵產(chǎn)生。它能夠在較寬的pH值范圍內(nèi)(pH4-12)保持活性,且在高溫條件下(65℃)仍能穩(wěn)定工作,這種穩(wěn)定性使蛋白酶K能夠在多種實(shí)驗(yàn)條件下發(fā)揮其作用,成為科研人員手中的得力助手。在分子生物學(xué)領(lǐng)域,蛋白酶K的應(yīng)用尤為廣泛。在DNA提取過程中,蛋白酶K能夠高效地降解細(xì)胞和組織中的蛋白質(zhì),包括那些與DNA緊密結(jié)合的組蛋白,從而釋放出純凈的DNA,為后續(xù)的PCR擴(kuò)增、測序等實(shí)驗(yàn)提供高質(zhì)量的DNA模板。此...
提到蛋白提取,大家不約而同會想到RIPA裂解液,裂解液加入樣品中,離心即可完成蛋白的提取。然而RIPA裂解液我們真的用對了嗎?RIPA裂解液是從動(dòng)物細(xì)胞或組織中提取蛋白的常用裂解液,其工作原理是利用去污劑(表面活性劑)裂解細(xì)胞膜和核膜,從而獲取細(xì)胞和組織中的RIPA可溶性蛋白。RIPA裂解液的選擇RIPA裂解液中主要包含去污劑,緩沖體系,等滲體系,變性劑、穩(wěn)定劑等。其中去污劑是細(xì)胞裂解液中重要成分,是由疏水尾端基團(tuán)和極性親水頭端基團(tuán)組成的兩性分子,它們能夠降低水的表面張力,所...
蛋白質(zhì)濃度測定是用于計(jì)算純化方法的回收率的重要方法。常用的測定方法包括雙縮脲法、Lowry法、紫外吸收法、BCA蛋白濃度檢測法等。其中常用的方法就是BCA法。BCA全稱是BicinchoninicAcidAssay,也叫SmithAssay,這個(gè)方法是由PaulK.Smith發(fā)明的。這個(gè)方法通過展示不同濃度樣品的顏色變化來判斷蛋白的濃度。檢測原理BCA是一種堿性的水溶性復(fù)合物,性質(zhì)穩(wěn)定。在其提供的堿性環(huán)境下,蛋白質(zhì)可以將BCA試劑中的Cu2+還原為Cu+,Cu+繼而與BCA試...
在現(xiàn)代生物技術(shù)領(lǐng)域,DNA電泳技術(shù)已成為一種實(shí)驗(yàn)手段。它廣泛應(yīng)用于基因克隆、基因突變檢測、DNA序列分析等領(lǐng)域。而DNA電泳套裝則是進(jìn)行這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的工具。本文將為您詳細(xì)介紹DNA電泳套裝的組成、原理及其在生物科研中的應(yīng)用。一、DNA電泳套裝的組成DNA電泳套裝主要包括以下幾部分:電泳儀:用于提供穩(wěn)定的直流電源,使DNA分子在電場作用下發(fā)生遷移。電泳槽:一般為矩形或梳子形狀,用于裝載電泳凝膠。電泳凝膠:由聚丙烯酰胺或瓊脂糖等物質(zhì)制成,是DNA分子遷移的載體。凝膠制備試劑:包括凝膠...
黑膠蟲是一種生物還是非生物,學(xué)術(shù)界至今還有爭議,這里暫且將其認(rèn)作是一種微生物。黑膠蟲往往來源于血清,是一種常見的細(xì)胞污染物,與細(xì)胞共生,隨細(xì)胞傳代而傳代,通??股貙ζ錈o效。黑膠蟲與細(xì)胞競爭性生長,對細(xì)胞生長不利,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。目前很多細(xì)胞存在被黑膠蟲污染的現(xiàn)象,對細(xì)胞培養(yǎng)及其后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成了極大地影響。黑膠蟲特征?培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基沒有區(qū)別;?低倍鏡下是黑色的點(diǎn)點(diǎn)和細(xì)胞碎片沒有區(qū)別;?高倍鏡下可以觀察到點(diǎn)狀片狀的游動(dòng)小體,能模仿細(xì)胞碎片和細(xì)胞分泌物做布朗運(yùn)動(dòng);?與細(xì)胞的...
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