產(chǎn)品描述

伴刀豆球蛋白A（ConA）磁珠是 粒徑為200 nm 的納米磁珠表面上共價結(jié)合了大量的伴刀豆球蛋白A（ConA）納米級磁珠提供的超大比表面積，具有更多的結(jié)合位點(diǎn)，磁珠使用量更少，非特異性吸附率低。用于分離細(xì)胞或從血清和細(xì)胞提取物中分離糖蛋白，并可以借助磁力架等磁分離設(shè)備非常便捷地應(yīng)用于分離糖蛋白，CUT&RUN CUT&Tag 等相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

訂購信息

運(yùn)輸與保存

藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃保存，有效期12個月。注：避免凍融或離心磁珠。

技術(shù)參數(shù)

使用方法

自備試劑

1.樣本處理

(1) 準(zhǔn)備哺乳動物細(xì)胞(1.0×104~1.0×105個)，離心收集(4℃，600×g，3-5min)，小心吸棄上清；

(2) 加入 500 μL 結(jié)合緩沖液，充分混勻重懸細(xì)胞，離心收集(4℃，600×g，3-5min)，小心吸棄上清；

(3) 加入 200-500 μL結(jié)合緩沖液，同時加入蛋白酶抑制劑，充分混勻，重懸細(xì)胞。

2.磁珠預(yù)處理

(4) 用移液器輕柔吹打伴刀豆球蛋白A磁珠 ，使其充分混勻，取10 µL磁珠懸液（可酌情調(diào)整磁珠用量）置于新的 1.5 mL離心管中，接著在磁力架上靜置 1 min，待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后，吸棄上清；

(5) 加入 500μL 結(jié)合緩沖液 ，用移液器輕柔吹打重懸磁珠，接著在磁力架上靜置 1 min，待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后，吸棄上清；

(6) 重復(fù)上個步驟(5)一次，注：面對多個樣品時，可先將總共所需的磁珠預(yù)處理后再分裝到各個反應(yīng)管中。

3.樣品的結(jié)合

(7) 在預(yù)處理后的磁珠中加入步驟3處理后的細(xì)胞樣本混合，置于旋轉(zhuǎn)混合儀上孵育（常溫30min），接著在磁力架上靜置 1min，待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后，小心吸棄上清，離心管中剩余的即為蛋白-磁珠復(fù)合物；

4.洗滌

(8) 在步驟(7)得到的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入500 μL洗滌緩沖液，用移液器輕柔吹打磁珠，并置于旋轉(zhuǎn)混勻儀上孵育5min，接著在磁力架上靜置1min，待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后，吸棄上清。再重復(fù)此步驟兩次；

5.蛋白洗脫

(9) 在步驟(8)得到的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入50~250 μL洗脫緩沖液，置于翻轉(zhuǎn)混合儀上孵育（常溫10-30 min），接著在磁力架上靜置 1 min，待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后，收集上清，即為目的蛋白。收集上清，即為目的蛋白。若洗脫效果不佳，可重復(fù)洗脫一次，或者增加孵育時間。

注意事項(xiàng)

1.   本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2.   請勿高速離心、干燥或冷凍磁珠，這些操作會導(dǎo)致磁珠聚集而降低結(jié)合能力。

3.   避免使用含有 EDTA 或其它金屬螯合劑的試劑，否則會降低磁珠與蛋白的結(jié)合效率 。

4.   磁珠使用前應(yīng)充分振蕩均勻。磁珠應(yīng)保存在儲存溶液中，防止干燥。

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本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。