黑膠蟲是一種生物還是非生物,學術界至今還有爭議,這里暫且將其認作是一種微生物。黑膠蟲往往來源于血清,是一種常見的細胞污染物,與細胞共生,隨細胞傳代而傳代,通??股貙ζ錈o效。黑膠蟲與細胞競爭性生長,對細胞生長不利,嚴重時導致細胞死亡。目前很多細胞存在被黑膠蟲污染的現(xiàn)象,對細胞培養(yǎng)及其后續(xù)實驗造成了極大地影響。
黑膠蟲特征
• 培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基沒有區(qū)別;
• 低倍鏡下是黑色的點點和細胞碎片沒有區(qū)別;
• 高倍鏡下可以觀察到點狀片狀的游動小體,能模仿細胞碎片和細胞分泌物做布朗運動;
• 與細胞的數(shù)量成反比,細胞越多,它越少,細胞越少它越多,更換培養(yǎng)液或洗滌細胞不能將其去除;
• 細胞生長緩慢,同時營養(yǎng)消耗快,需頻繁更換培養(yǎng)液,細胞狀態(tài)越養(yǎng)越差。
解決方法
• 若細胞狀態(tài)尚可,最為快速有效的處理方式就是采用黑膠蟲清除劑對黑膠蟲進行清除,同時確保培養(yǎng)體系中的血清必須為無黑膠蟲和原蟲污染的優(yōu)質血清,然后增加細胞密度,繼續(xù)培養(yǎng)2-3代可清除;
• 若細胞狀態(tài)很差,建議消殺后丟棄。
• 黑膠蟲污染的細胞培養(yǎng)液不渾濁,顏色、透明度無明顯變化,細胞增殖旺盛后會自然消失,更換血清外無需特殊處理可以增加細胞的種板密度以提高細胞的生存率,對于黑膠蟲的污染目前只能采用高品質的血清進行預防。
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